RNA Later -نگهدارنده RNA

نگهدارنده RNA

مقدمه:
محلول پایدارکننده RNA (RNAlater) یا RNA PROTECTOR یک معرف آبی نگه‌دارنده بافت است که به‌سرعت به داخل بیشتر بافت‌ها نفوذ کرده و از مولکول RNA در نمونه‌های تازه حفاظت می‌کند. درنتیجه دیگر نیاز نیست که نمونه‌ها را فریز کنید بلکه آن‌ها را در محلول پایدارکننده RNA (RNAlater) غوطه‌ور کنید تا در زمان دیگری آزمایشات را انجام دهید.

در شرایطی که تجزیه RNA سریع رخ می‌دهد، با نگه‌داری نمونه‌ها در RNAlater پایداری آن‌ها را حفظ می‌شود. می‌توان بافت را به‌طور نامحدود در این محلول در دمای 20- درجه سانتی‌گراد نگه‌داری کرد.

محلول پایدارکننده RNA (RNAlater)، بر بافت‌های پستانداران، گیاهان، ماهی، دروزوفیلا، قورباغه پنجه‌دار و باکتری اشریشیا کلی تست شده است. RNAlater همچنین با روش‌های تک مرحله‌ای استخراج RNA و سایر روش‌ها ازجمله اسید فنل، oligo(dT) و glass binding سازگار است.

همچنین می‌توان DNA را از سمپل هایی که در محلول RNAlater نگه‌داری کرده‌اید، استخراج کرد.

علاوه بر این پروتئین‌ها نیز در این محلول نگه‌داشته می‌شوند. محلول پایدارکننده RNA پروتئین‌ها را دناتوره می‌کند و درنتیجه این مولکول‌های پروتئین در تکنیک‌هایی مانند وسترن بلاتینگ یا الکتروفورز دوبعدی مورداستفاده قرار می‌گیرد ولی برای پروسه‌هایی که نیازمند پروتئین کامل و دست‌نخورده می‌باشد، مناسب نیست.

تحقیقات نشان می‌دهد که استفاده از محلول پایدارکننده  (RNAlater) RNA، جهت ذخیره‌سازی بافت، نتیجه آزمایش‌های آنالیز بیان RNA بعدی را تحت تأثیر قرار نمی‌دهد.

کاربردها و مزایا:

• RNA  برای 1 روز در 37 درجه سانتی‌گراد، 1 هفته در 25 درجه سانتی‌گراد، 1 ماه در 4 درجه سانتی‌گراد یا به‌طور نامحدود در 20- درجه سانتی‌گراد در محلول RNAlaterپایدار می‌ماند.

• غیرفعال شدن فوری RNase

• رفع نیاز به نیتروژن مایع و فریزرها

• یخ زدگی را به حداقل می رساند

• ایده آل برای تثبیت RNA  در بافت و سلول

• ذخیره سازی انعطاف پذیر بافت

• سازگار با اکثر روشهای جداسازی RNA از جمله همه کیتهای جداسازی

• سازگار با بیان ژن و داده های پروفایل ژن

• بایگانی قابل اعتماد بافت بدون تخریب

• حفظ RNA سلولی را در نمونه های سالم ، دست نخورده و منجمد نشده

شرایط  نگهداری از محلول RNAlater

محلول RNAlater در دمای اتاق به مدت 1 سال قابل نگه داری می باشد.

در صورت مشاهده بلورها و یا ناخالصی ها ، آن را در دمای 37 درجه سانتی گراد گرم کنید تا بلورها حل شده و محلول یکدست شود.

در صورتیکه بلورها در دمای 37 درجه سانتی گراد حل نشدند ، محلول RNAlater را به مدت 30 دقیقه در دمای 65 درجه سانتی گراد گرم کنید و مرتبا محلول را با تکان دادن بطری مخلوط کنید. وقتی محلول RNAlater شفاف و یکدست شد ، آن را به قسمت های مورد نیاز خود تقسیم کنید.